В:Брате, реверзна транскрипција је завршена, и коначно последњи корак – флуоресцентни квантитативни ПЦР!Хеј, брате, шта је квантитативни ПЦР у реалном времену?
М:ПЦР увек знаш, зар не?
В: Знате, ПЦР је ланчана реакција полимеразе, и то је технологија која повећава ДНК!
М: Скоро је... То је техничка метода да се циљна секвенца појача на више од милион пута кроз специфичне прајмере, али ово само указује на присуство или одсуство циљне секвенце и не може да одреди количину почетног шаблона.Флуоресцентни квантитативни ПЦР је техничка метода развијена за решавање овог проблема.ПЦР у реалном времену и количински ПЦР (кПЦР) углавном се односе на њега.
В: Разлика од обичног ПЦР-а лежи у квантификацији флуоресценције?
М: Да, то јест, у фази продужења сваког ПЦР циклуса, детектује се интензитет сигнала флуоресценције, а почетна количина шаблона се може израчунати према промени интензитета сигнала.
В: Делује тако компликовано!Да ли ово морам сам да израчунам?
М: Ово захтева да учите полако, најбоље је да можете да разумете принцип.Сада можете прво да се фокусирате на ЦТ вредност, што је релативно интуитиван експериментални податак, а његова величина одговара величини почетне количине шаблона.Постоје и графикони као што су криве појачања и криве топљења.Они имају последњу реч о томе да ли је ваш експеримент успешан или не.
В: Ох, брате.Онда ћу да урадим кПЦР експеримент!
М: Обратите посебну пажњу да не додајете шаблоне у подручје реагенса, иначе ће ваша неискоришћена мешавина бити лако контаминирана!
В: Схватио сам!

Реал Тиме ПЦР Еасиᵀᴹ-СИБР Греен И Кит

Већа ефикасност, већа специфичност
Висока осетљивост, добра компатибилност