Комплет за изолацију вирусне ДНК и РНК Комплети за припрему пречишћавања екстракције вирусне ДНК и РНК
Спецификације
50 припрема, 200 припрема
Комплет за изолацију екстракције нуклеинске киселине за пречишћавање вирусне РНК користи спин колону и формулу коју је развио Форегене, која може ефикасно екстраховати вирусну РНК високе чистоће и високог квалитета из узорака као што су плазма, серум, телесна течност без ћелија и супернатант ћелијске културе.Комплет посебно додаје линеарни акриламид, који лако може да ухвати мале количине РНК из узорака.Колона само за РНК може ефикасно да веже РНК.Комплет може обрадити велики број узорака истовремено.
Цео комплет не садржи РНКазу, тако да се пречишћена РНК неће разградити.Пуфер виРВ1 и пуфер виРВ2 могу да обезбеде да добијена вирусна нуклеинска киселина не садржи протеине, нуклеазе или друге нечистоће, што се може директно користити за низводне експерименте молекуларне биологије.
Компоненте комплета
| Линеарни акриламид |
| Буффер ДРЛ |
| Пуфер РВ1, Бафер РВ2 |
| ддХ без РНазе2O |
| ДНК/РНА колона |
| Упутства |
Карактеристике и предности
■ Рад на собној температури (15-25℃) током целог процеса, без леденог купатила и нискотемпературног центрифугирања.
■ Комплетан комплет без РНасе, нема потребе да бринете о деградацији РНК.
■ Висок принос нуклеинске киселине: Колона само за ДНК/РНК и јединствена формула могу ефикасно да пречисте ДНК и РНК.
■ Велики капацитет обраде узорака: сваки пут се може обрадити до 200 μл узорака.
■ Велика брзина: једноставан за руковање и може се завршити у року од 20 минута.
■ Безбедност: није потребан органски реагенс.
■ Висок квалитет: Пречишћени фрагменти РНК су високе чистоће, без протеина и других нечистоћа, и могу задовољити различите низводне експерименталне примене.
Апликација комплета
Погодан је за екстракцију и пречишћавање вирусне нуклеинске киселине у узорцима као што су плазма, серум, телесна течност без ћелија и супернатант ћелијске културе.
Процес рада
Дијаграм
Складиштење и рок трајања
■ Овај комплет се може чувати 24 месеца у сувим условима на собној температури (15-25℃);ако треба да се чува дуже време, може се чувати на 2–8 ℃.
■ Линеарни раствор акриламида може се чувати на собној температури 7 дана;након што добијете комплет, извадите га и чувајте на -20°Ц.
■ Након додавања линеарног акриламида у пуфер ДРЛ, може се чувати на 2-8°Ц до 48 сати.Молимо користите готово решење.
Водич за анализу проблема
Следи анализа проблема који се могу појавити приликом екстракције вирусне ДНК/РНК, у нади да ће бити од помоћи вашим експериментима.Поред тога, за друге експерименталне или техничке проблеме осим упутстава за рад и анализе проблема, ми смо наменили техничку подршку да вам помогнемо.Уколико имате било какве потребе, контактирајте нас: 028-83360257 или на е-маил:
Tech@foregene.com.
Нема екстракције нуклеинске киселине или мали принос нуклеинске киселине
Обично постоји много фактора који утичу на ефикасност опоравка, као што су: садржај нуклеинске киселине у узорку, начин рада, запремина елуирања итд.
Анализа уобичајених узрока:
1. У току поступка је извршено ледено купатило или центрифугирање на ниској температури (4°Ц).
Препорука: Радите на собној температури (15-25°Ц) током целог процеса, не купати у леденом купатилу и центрифугирати на ниској температури.
2. Узорак је непрописно ускладиштен или је узорак чуван предуго.
Препорука: Чувати узорке на -80°Ц и избегавати поновно замрзавање и одмрзавање;покушајте да користите свеже сакупљене узорке за екстракцију нуклеинске киселине.
3. Недовољна лиза узорка.
Препорука: Уверите се да су узорак и радни раствор за лизу добро измешани и инкубирани на собној температури (15-25°Ц) 10 минута.
4. Нетачно додавање елуента.
Предлог: Уверите се да је ддХ2О без РНасе додат у капима у средину мембране колоне за пречишћавање и немојте га испуштати на прстен колоне за пречишћавање.
5. Тачна запремина апсолутног етанола није додата пуферу РВ2.
Предлог: Молимо пратите упутства, додајте тачну количину апсолутног етанола у пуфер РВ2 и добро промешајте пре употребе комплета.
6. Неодговарајућа запремина узорка.
Препорука: 200 µл узорка се обрађује на сваких 500 µл пуфера ДРЛ.Прекомерна обрада узорка ће резултирати мањим приносом екстракције нуклеинске киселине.
7. Неодговарајућа запремина елуирања или непотпуно елуирање.
Препорука: Запремина елуента колоне за пречишћавање је 30-50μл;ако ефекат елуирања није задовољавајући, препоручује се да се продужи време на собној температури након додавања претходно загрејаног ддХ2О без РНазе, као што је 5-10 мин.
8. Етанол остаје на колони након испирања пуфером РВ2.
Предлог: Ако етанол остане након центрифугирања са пуфером РВ2 током 2 минута, колона се може ставити на собну температуру 5 минута након центрифугирања да би се у потпуности уклонио преостали етанол.
Пречишћена нуклеинска киселина се разграђује
Квалитет пречишћене нуклеинске киселине је везан за очување узорка, контаминацију РНазом, рад и друге факторе.Анализа уобичајених узрока:
1. Прикупљени узорци нису на време ускладиштени.
Препорука: Ако се узорак не употреби на време након сакупљања, одмах га чувајте на -80°Ц на ниској температури.За екстракцију РНК покушајте да користите свеже сакупљене узорке.
2. Сакупите узорке и замрзните и одмрзните више пута.
Препорука: Избегавајте замрзавање и одмрзавање (не више од једном) током сакупљања и складиштења узорака, иначе ће принос нуклеинске киселине бити смањен.
3. РНасе се уводи у операциону салу или се не носе рукавице за једнократну употребу, маске итд.
Препорука: Експерименте екстракције РНК најбоље је изводити у посебној операционој сали РНК, а лабораторијски сто треба очистити пре експеримента.
Носите рукавице и маске за једнократну употребу током експеримента да бисте избегли деградацију РНК узроковану увођењем РНКазе у највећој мери.
4. Реагенс је био контаминиран РНазом током употребе.
Препорука: Замените новим комплетом за изолацију вирусне ДНК/РНА за повезане експерименте.
5. Центрифугалне епрувете и врхови пипете који се користе за манипулацију РНК су контаминирани РНазом.
Предлог: Уверите се да епрувете за центрифугирање, врхови пипета, пипете итд. који се користе за екстракцију РНК не садрже РНКазу.
Пречишћена нуклеинска киселина утиче на низводне експерименте
ДНК и РНК пречишћене колоном за пречишћавање, ако је садржај јона соли и протеина превисок, то ће утицати на низводне експерименте, као што су: ПЦР амплификација, реверзна транскрипција, итд.
1. Елуиране ДНК и РНК имају заостале јоне соли.
Препорука: Уверите се да је тачна запремина апсолутног етанола додата пуферу РВ2, и оперите колону за пречишћавање два пута брзином центрифугирања наведеном у упутству за употребу;Извршите центрифугирање да бисте минимизирали контаминацију јонима соли.
2. Елуиране ДНК и РНК имају остатке етанола.
Предлог: Након потврде испирања са пуфером РВ2, извршите центрифугирање празне епрувете при брзини центрифугирања у упутству за употребу;ако још увек има остатака етанола, можете центрифугирати празну епрувету и затим је ставити на собну температуру на 5 минута да бисте уклонили остатак етанола у највећој мери.
Упутства за употребу:
Приручник за употребу комплета за изолацију вирусне ДНК&РНА
