Изградња СОП система

Успоставити СОП за ПЦР експеримент да стандардизује понашање особља за експеримент.

Експериментатори се стриктно придржавају оперативних процедура и минимизирају ПЦР загађење које може бити узроковано људским фактором или спречавају појаву загађења у операцији.Поред тога, експериментатор треба да поседује одговарајућа професионална знања и вештине, укључујући вештину у руковању пратећом опремом, појашњавању целокупног процеса рада, овладавању методама третмана контаминације и методама лабораторијске контроле квалитета, као и способношћу да правилно интерпретира резултате испитивања.

Изградња стандардне ПЦР лабораторије

ПЦР лабораторија је у принципу подељена на четири области, односно област за припрему реагенса, област за обраду узорака, област амплификације и област анализе производа амплификације.Прве две области су области пре појачања, а последње две области су области после појачања.Зона пре појачања и зона после појачања треба да буду строго одвојене.Експериментални материјали, реагенси, папир за снимање, оловке, материјали за чишћење итд. могу да теку само из области пре амплификације у област после амплификације, односно из области за припрему реагенса, области обраде узорка, области амплификације и области анализе производа амплификације, и не смеју да тече у обрнутом смеру.Проток ваздуха у лабораторији такође треба да тече из области пре појачања у област после појачања, а не у обрнутом смеру.

Смањите експерименталне кораке

Ако лабораторија обавља само ПЦР детекцију и идентификацију, препоручује се употреба флуоресцентне квантитативне ПЦР уместо конвенционалне ПЦР.

Резултати квантитативне ПЦР детекције флуоресценције могу се прикупити и анализирати флуоресцентним сигналима, тако да нема потребе за отварањем поклопца за електрофорезу након реакције, чиме се избегава контаминација ПЦР производа узрокована цурењем производа реакције у аеросол.Ако повећате број отвора поклопца током корака пуњења гел електрофорезе, вероватно ће доћи до контаминације аеросолом.Препоручује се промовисање примене квантитативне ПЦР и постепено замењивање квалитативне ПЦР.

Усвојити УНГ систем против загађења

За ПЦР реакцију се користи УНГ анти-ПЦР систем контаминације производа.

Систем користи дУТП уместо дТТП.Након ПЦР реакције, сви ПЦР производи (ДНК фрагменти) су инкорпорирани са дУТП;у следећем кругу ПЦР реакције, ензим УНГ који је додат систему се инкубира на 37°Ц 5 минута пре ПЦР-а, што може бити специфично. Деградирати све фрагменте ДНК који садрже дУТП, а затим извести ПЦР реакцију.Ово може у потпуности уклонити аеросолну контаминацију узроковану ПЦР производима.Ефекат је приказан на слици испод:

Напомена: За директну ПЦР серију, можете одабрати серијске производе система за загађење анти-ПЦР производа компаније ФЈ Биотецх

Предложи

За лабораторије које спроводе испитивање генотипизације великих размера, снажно се препоручује коришћење УНГ анти-ПЦР система контаминације производа за тестирање реагенса поред изградње разумних лабораторија.

Подсетник: Коришћење овог система не може да уклони већ проузроковану контаминацију ПЦР производа.Према томе, УНГ систем треба користити на почетку релевантног теста, а УНГ систем увек треба користити за ПЦР амплификацију, како би се спречила контаминација ПЦР производа.Лажно позитиван.

Препоручљиво је користити Дирецт ПЦР-УНГ систем Форге Биотецх-а приликом спровођења великих тестирања, као што су: Плант Леаф Дирецт ПЦР Кит-УНГ；

Сет за директно ПЦР семе биљака-УНГ;

Комплет за директно ПЦР животињског ткива-УНГ;

Комплет за директни ПЦР реп миша-УНГ;

Зебра Фисх Дирецт ПЦР Кит-УНГ.

Ова серија комплета компаније Форегене не само да може брзо и у великој мери да изврши ПЦР детекцију, већ и ефикасно спречи и контролише контаминацију ПЦР производа.