Увод:

Молекули РНК могу да ступају у екстензивну интеракцију са другим биолошким молекулима, као што су протеини, ДНК и РНК, и тако постоје у ћелијама и организмима у облику макромолекуларних комплекса.Међу њима, РНК-протеински комплекси су постојање и функција РНК Један од важних облика.РНА пулл-довн је класична метода за скрининг и идентификацију молекула РНК, посебно протеина лнцРНА молекула у интеракцији, и призната је од стране већине истраживача и међународних ауторитативних академских часописа.Данас ће ФОРРЕГЕНЕ са вама поделити експериментални принцип и технички процес повлачења РНК, можда можете да га користите

1. Експериментални принцип технологије скидања РНК:

Ин витро транскрипција и синтеза биотином обележених циљних лнцРНА или лнцРНА фрагмената (укључујући фрагменте РНК који се користе као позитивне и негативне контроле), и инкубирати са ћелијским екстрактима;користите магнетне перле усидрене авидином за сакупљање РНК-протеина или РНК-РНА комплекса. Након темељног испирања, комплекс се елуира.Ако се детектује циљни молекул протеина који ступа у интеракцију са лнцРНА, извршите електрофорезу протеина на РНК-пулл-довн производу, откријте циљни протеин бојењем сребром и исеците гел за масену спектрометрију;такође директно изврши вестерн блот верификацију на падајућем производу;ако се открије. За циљне молекуле РНК који ступају у интеракцију са лнцРНА, производи повлачења РНК се подвргавају екстракцији РНК и врши се специфична кРТ-ПЦР детекција.

2. Процес експеримента технологије скидања РНК:

3. Техничка служба за скидање РНК за ФОРЕГЕНЕ:

Ћелијска култура

Припрема екстракта укупних/нуклеарних/плазма протеина ћелија

Експеримент повлачења РНК

СДС-ПАГЕ електрофореза, сребрна мрља

Масена спектрометрија и ВБ експерименти

Експериментални извештај

4. Експериментални случај

На следећој слици су приказани резултати ФЈ Био-Био РНА повлачења и детекције електрофорезе СДС-ПАГЕ, у којима црвена стрелица означава опсег разлике:

Истраживачка група професора Сонг Ксуа са Универзитета Сечуан акумулирала је 15 година дуготрајне акумулације у области истраживања лнцРНА.Форегене Био и истраживачка група професора Сонг Ксуа сарађивали су на покретању технологије лнцРНА за повлачење РНК, која ће вам дати задовољавајући резултат за ваш експеримент.