• Фејсбук
  • линкедин
  • ЈуТјуб
English
паге_баннер

Фореаси ХС Так ДНК полимераза

Истакнута слика Фореаси ХС Так ДНК полимеразе
  • Фореаси ХС Так ДНК полимераза

Опис комплета:

◮Висока специфичност: Ензим са високом активношћу при покретању.

◮Брзо појачање: 10 сек/кб.

◮Висока прилагодљивост шаблона: може се користити за ефикасно појачавање ХигхGCвредностиразни ДНК шаблон који се тешко умножава.

◮Јака верност: Верност је 6 путаof обични Так ензим.

фореген снагу


Детаљи о производу

Ознаке производа

ФАК

Опис

Фореаси ХС Так ДНК полимераза је нови Так ензим експримиран у инжењерским бактеријама Есцхерицхиа цоли технологијом рекомбинације гена.Након што се ензим третира посебним поступком, он'активност је инхибирана пре термичке активације, чиме се инхибира неспецифично појачање узроковано неспецифичним жарењем прајмера или димера прајмера под условима ниске температуре.Овај производ је погодан за високо специфичну ПЦР Реацтион, вишеструки к ПЦР , висок садржај ГЦ (> 60%),сасекундарна структураили другојак позадински геномицсамплификација и геном великих размераицсдетекција појачања.Ензим има активност 5' → 3' ДНК полимеразе и 5' → 3' егзонуклеазну активност, али нема активност 3' → 5' егзонуклеазе.

Компоненте комплета

Саставни део ИМ-01021 ИМ-01022 ИМ-01023
Фореаси ХС Так ДНК полимераза (5 У/μЛ)  5000 У (1 мЛ)  50 КУ (10 мЛ)  500 КУ (100 мЛ)
2× Так Реацтион Буффер  25мЛ ×5  250 мЛ ×5  500 мл × 25

Карактеристике и предности

- Висока специфичност: Ензим са високом активношћу при покретању.

- Брзо појачање: 10 сек/кб.

- Висока прилагодљивост шаблона: може се користити за ефикасно појачање ХигхGCвредностиразни ДНК шаблон који се тешко умножава.

- Јака верност: верност је 6 путаof обични Так ензим.

Апликација комплета

- Различити ПЦР/кПЦР систем и директни ПЦР систем

- ПЦР амплификовани фрагмент ДНК

- ДНК ознака

- ДНК секвенцирање

- ПЦР плус А реп

Дефиниција активности

1У : Количина ензима потребна за уградњу 10 нмолДНКу материју нерастворну у киселини користећи активирану ДНК сперме лососа као шаблон / прајмер, 74 °Ц, 30 минута.

Реацтион Цондитион

Температура Време реакције Време циклуса
ден: 37°Ц 5 мин 1
ден: 94°Ц 5 мин 1
ден: 94°Ц 10 Сецс  40
ден: 60°Ц 10 Сецс

Белешка:За системе од 10 µЛ и 20 µЛ, додајте једнаку запремину минералног уља ако термоциклер нема поклопац за грејање.

Услови ПЦР реакције варирају у зависности од структурних услова шаблона, прајмера и слично.У специфичној операцији, потребно је дизајнирати оптималне услове реакције, укључујући температуру жарења, време продужетка итд., у складу са специфичним условима као што су тип шаблона, величина циљног фрагмента, базна секвенца амплификованог фрагмента, као и ГЦ садржај и дужина прајмера.

Складиште

-20 ± 5 °Ц током 2 године или на -80 °Ц за дуготрајно складиштење.

  • Претходна:
  • Следећи:

    • Нема појачања сигнала

    1.Так ДНК полимераза у комплету губи своју активност због неправилног складиштења или истека комплета.
    Препорука: Потврдите услове складиштења комплета;поново додајте одговарајућу количину Так ДНК полимеразе у ПЦР систем или купите нови комплет за ПЦР у реалном времену за повезане експерименте.

    2. Постоји много инхибитора Так ДНК полимеразе у ДНК шаблону.
    Предлог: Пречистите шаблон или смањите количину коришћеног шаблона.

    3. Концентрација Мг2+ није погодна.
    Препорука: Концентрација Мг2+ у 2× Реал ПЦР мешавини коју пружамо је 3,5 мМ.Међутим, за неке посебне прајмере и шаблоне, концентрација Мг2+ може бити већа.Због тога можете директно додати МгЦл2 да бисте оптимизовали концентрацију Мг2+.Препоручује се повећање Мг2+ за 0,5мМ сваки пут ради оптимизације.

    4. Услови ПЦР амплификације нису прикладни, а секвенца прајмера или концентрација је неодговарајућа.
    Предлог: потврдите исправност секвенце прајмера и прајмер није деградиран;ако сигнал појачања није добар, покушајте да смањите температуру жарења и на одговарајући начин подесите концентрацију прајмера.

    5. Количина шаблона је премала или превелика.
    Препорука: Извршите разблаживање градијентом линеаризације шаблона и изаберите концентрацију шаблона са најбољим ПЦР ефектом за ПЦР експеримент у реалном времену.

    НТЦ има превисоку вредност флуоресценције

    1. Контаминација реагенсом током рада.
    Препорука: Замените новим реагенсима за ПЦР експерименте у реалном времену.

    2. До контаминације је дошло током припреме ПЦР реакционог система.
    Препорука: Предузмите неопходне заштитне мере током рада, као што су: ношење рукавица од латекса, употреба врха пипете са филтером итд.

    3. Прајмери ​​су деградирани, а деградација прајмера ће изазвати неспецифично појачање.
    Предлог: Користите СДС-ПАГЕ електрофорезу да откријете да ли су прајмери ​​деградирани и замените их новим прајмерима за ПЦР експерименте у реалном времену.

    Димер прајмера или неспецифична амплификација

    1. Концентрација Мг2+ није погодна.
    Препорука: Концентрација Мг2+ у 2× Реал ПЦР ЕасиТМ мешавини коју пружамо је 3,5 мМ.Међутим, за неке посебне прајмере и шаблоне, концентрација Мг2+ може бити већа.Због тога можете директно додати МгЦл2 да бисте оптимизовали концентрацију Мг2+.Препоручује се повећање Мг2+ за 0,5мМ сваки пут ради оптимизације.

    2. Температура ПЦР жарења је прениска.
    Предлог: Сваки пут повећајте температуру ПЦР жарења за 1℃ или 2℃.

    3. ПЦР производ је предугачак.
    Препорука: Дужина ПЦР производа у реалном времену треба да буде између 100-150бп, не више од 500бп.

    4. Прајмери ​​су деградирани, а деградација прајмера ће довести до појаве специфичне амплификације.
    Предлог: Користите СДС-ПАГЕ електрофорезу да откријете да ли су прајмери ​​деградирани и замените их новим прајмерима за ПЦР експерименте у реалном времену.

    5. ПЦР систем је неисправан или је систем премали.
    Предлог: ПЦР реакциони систем је премали што ће довести до смањења тачности детекције.Најбоље је користити реакциони систем који препоручује квантитативни ПЦР инструмент за поновно покретање ПЦР експеримента у реалном времену.

    Слаба поновљивост квантитативних вредности

    1. Инструмент је неисправан.
    Предлог: Може постојати грешке између сваког ПЦР отвора на инструменту, што доводи до лоше поновљивости током управљања температуром или детекције.Проверите према упутствима одговарајућег инструмента.

    2. Чистоћа узорка није добра.
    Препорука: Нечисти узорци ће довести до лоше поновљивости експеримента, што укључује чистоћу шаблона и прајмера.Најбоље је поново пречистити шаблон, а прајмери ​​се најбоље пречишћавају помоћу СДС-ПАГЕ.

    3. Време припреме и складиштења ПЦР система је предуго.
    Предлог: Користите ПЦР систем у реалном времену за ПЦР експеримент одмах након припреме и не остављајте га предуго по страни.

    4. Услови ПЦР амплификације нису прикладни, а секвенца прајмера или концентрација је неодговарајућа.
    Предлог: потврдите исправност секвенце прајмера и прајмер није деградиран;ако сигнал појачања није добар, покушајте да смањите температуру жарења и на одговарајући начин подесите концентрацију прајмера.

    5. ПЦР систем је неисправан или је систем премали.
    Предлог: ПЦР реакциони систем је премали што ће довести до смањења тачности детекције.Најбоље је користити реакциони систем који препоручује квантитативни ПЦР инструмент за поновно покретање ПЦР експеримента у реалном времену.

    Напишите своју поруку овде и пошаљите нам је

    ПовезанПроизводи

    Притисните ентер за претрагу или ЕСЦ да затворите