• Фејсбук
  • линкедин
  • ЈуТјуб
паге_баннер

Комплет за изолацију укупне РНК плус комплет за пречишћавање укупне РНК за биљке богате полисахаридима и полифенолима

Опис комплета:

 

Кат.бр.РЕ-05021/05022/05024

 

За пречишћавање укупне РНК из општих биљних узорака који садрже високе полисахариде и полифенолне компоненте.

Брзо екстрахујте висококвалитетну укупну РНК из биљних узорака са високим садржајем полисахарида и полифенола.

Без РНазе помоћу колоне за чишћење ДНК

Једноставно – све операције се обављају на собној температури

Брзо — операција се може завршити за 30 минута

Безбедан - не користи се органски реагенс фореген снагу


Детаљи о производу

Ознаке производа

ФАК

ПРЕУЗМИТЕ РЕСУРСЕ

Спецификације

50 припрема, 200 припрема

Комплет користи спин колону и формулу коју је развио Форегене, која може ефикасно екстраховати укупну РНК високе чистоће и високог квалитета из различитих биљних ткива са високим садржајем полисахарида или полифенола.Обезбеђује колону за чишћење ДНК која може лако уклонити геномску ДНК из супернатанта и лизата ткива.Колона која садржи само РНК може ефикасно да веже РНК.Комплет може обрадити велики број узорака истовремено.

Цео систем не садржи РНКазу, тако да се пречишћена РНК неће разградити.Пуфер ПРВ1 и пуфер ПРВ2 могу осигурати да добијена РНК није контаминирана протеинима, ДНК, јонима и органским једињењима.

Компоненте комплета

Буффер ПСЛ1, Буффер ПС, Буффер ПСЛ2

Бафер ПРВ1, Бафер ПРВ2

ддХ без РНазе2О, Колона за чишћење ДНК

Колона само за РНК

Карактеристике и предности

■ Рад на собној температури (15-25℃) током целог процеса, без леденог купатила и нискотемпературног центрифугирања.
■ Комплетан комплет без РНасе, нема потребе да бринете о деградацији РНК.
■ Посебно погодан за пречишћавање РНК из биљних узорака полисахарида и полифенола.
■ Колона за чишћење ДНК се специфично везује за ДНК, тако да комплет може да уклони контаминацију геномске ДНК без додавања ДНАзе.
■ Висок принос РНК: Колона која садржи само РНК и јединствена формула могу ефикасно да пречисте РНК.
■ Велика брзина: једноставан за руковање и може се завршити у року од 30 минута.
■ Безбедност: није потребан органски реагенс.
■ Висок квалитет: Пречишћени фрагменти РНК су високе чистоће, без протеина и других нечистоћа, и могу задовољити различите низводне експерименталне примене.

Параметри производа

■ Ниже примене: синтеза првог ланца цДНК, РТ-ПЦР, молекуларно клонирање, Нортхерн блот итд.
■ Узорак: свеже или смрзнуто биљно ткиво полисахарида и полифенола
■ Дозирање: 50мг биљног ткива
■ Максимални капацитет везивања РНК колоне за пречишћавање: 80 μг
■ Запремина елуирања: 50-200 μл

Апликација комплета

Погодан је за екстракцију и пречишћавање укупне РНК из свежих или смрзнутих узорака биљног ткива (посебно свежег биљног листа) са високим садржајем полисахарида и полифенола.

Процес рада

биљне укупне РНК-једноставан радни ток

Дијаграм

Комплет за изолацију укупне РНК биљака Плус 6

Плант Тотал РНА Исолатион Кит Плус је обрадио 50 мг свежих листова полисахарида и полифенола, а 5% пречишћена РНК је тестирана електрофорезом.
1: Банана
2: Гинко
3: Памук
4: Нар

Складиштење и рок трајања

Овај комплет се може чувати 24 месеца у сувим условима на собној температури (15-25℃);ако треба да се чува дуже време, може се чувати на 2–8 ℃.
Пуфер ПСЛ1 се може ставити на 4℃ 1 месец након додавања β-меркаптоетанола (препоручљиво је додати у исто време експеримента).


  • Претходна:
  • Следећи:

  • Колона се запушила

    Након зачепљења колоне, принос РНК је смањен или је чак немогуће пречистити РНК, а добијена РНК маса је ниска.

    Анализа уобичајених узрока:

    1. Паузе узорака нису темељне.

    Ломљење узорка не доводи до потпуног блокирања КОЛОНЕ ЗА ЧИШЋЕЊЕ ДНК, док утиче на принос и квалитет РНК.Препоручујемо брзу операцију млевења у довољној количини течног азота када разбијете узорке. Покушајте да здробите ћелијски зид узорка, ћелијску мембрану и друго ткиво.За биљне узорке полиол полисахарида, препоручујемо да користите Плант Тотал РНА ИСОЛАТИОН КИТ ПЛУС.

    2. Приликом усисавања одвојеног супернатанта узорка помоћу колоне за чишћење ДНК, могући ћелијски фрагментирани преципитат се може удахнути.

    Узети ћелијски фрагментирани седименти ће изазвати колону САМО РНК која ће бити блокирана када се изврши операција адсорпције РНК (погледајте корак 6).Препоручујемо вам да пажљиво усисавате овај супернатант како бисте избегли усисавање ћелијских остатака.

    3. Почетни износ узорка је превелик.

    Прекомерна употреба узорка ће довести до непотпуне фрагментације узорка или непотпуне ћелијске лизе пуфером ПСЛ1, што ће резултирати блокадом колоне за пречишћавање током пречишћавања.Комплет за изолацију укупне РНК биљака Сваки појединачни пречишћени оперативни узорак је 50 мг.За биљне узорке полиол полисахарида, препоручујемо да испробате Плант Тотал РНА ИСОЛАТИОН КИТ ПЛУС.

    4. Температура центрифуге је прениска.

    Цео процес изолације и пречишћавања РНК се одвија на собној температури (20-25°Ц), осим што је ткиво узорка разбијено течним азотом. Температура неких криогених центрифуга је нижа од 20°Ц., што може изазвати блокаду колоне за чишћење ДНК и/или колоне само за РНК.Ако се то догоди, подесите температуру центрифуге на 20-25, иуверите се да су смеша за лизу и/или супернатант са додатком етанола претходно загрејана на 37°C.

    РНК се не екстрахује или је принос РНК низак

    Обично постоји много фактора који утичу на ефикасност опоравка, као што су: садржај узорка РНК, начин рада, запремина елуирања итд.

    Анализа уобичајених узрока као у наставку:

    1. У току операције извршено је ледено купатило или центрифугирање на ниској температури (4°Ц).

    Препорука: Радите на собној температури (15-25°Ц) у целом процесу немојте радити ледено купатило и нискотемпературно центрифугирање.

    2. РНК је деградирана због неправилног чувања узорка или дуготрајног чувања узорка.

    Препорука: Свеже сакупљене узорке треба брзо замрзнути у течном азоту, а затим чувати на -80°Ц дуже време, избегавати поновно замрзавање и одмрзавање узорака;или одмах потопите узорке у раствор РНК стабилизатора РНАлатер (животињски узорци).

    3. Недовољна фрагментација узорка и лиза доводе до блокаде колоне за пречишћавање.

    Предлог: Приликом млевења ткива, уверите се да је ткиво довољно млевено и брзо га пребаците у унапред припремљени пуфер ПСЛ1 (потврдите да је додат тачан однос β-МЕ, погледајте 1. корак процедуре).

    4.Елуент је додат погрешно.

    Препорука: Уверите се да је ддХ2О без РНазе укапан у средину мембране колоне за пречишћавање.

    5. Тачна запремина апсолутног етанола није додата у пуфер ПСЛ2 или пуфер ПРВ2.

    Предлог: Пратите упутства, додајте тачну количину апсолутног етанола у пуфер ПСЛ2 и пуфер ПРВ2 и добро промешајте пре употребе комплета.

    6. Количина узорка ткива је неодговарајућа.

    Препорука: Користите 50 мг ткива на 500 μл пуфера ПСЛ1.Коришћење превише ткива ће смањити количину екстраховане РНК, а такође ће бити смањена и чистоћа резултујуће РНК.Препоручујемо да почетна доза узорка не прелази 50 мг по операцији екстракције РНК.

    7. Неодговарајућа запремина елуирања или непотпуно елуирање.

    Препорука: Запремина елуента колоне за пречишћавање је 50-200 μл;ако ефекат елуирања није задовољавајући, препоручује се да се продужи време на собној температури након додавања претходно загрејаног ддХ2О без РНазе, као што је 5-10 мин.

    8. Колона за пречишћавање има остатак етанола након испирања са пуферомПРВ2.

    Предлог: Ако се празна епрувета центрифугира 1 мин и још увек има етанола који је остао након прања у пуферу ПРВ2, можете повећати време центрифугирања празне епрувете на 2 мин или ставити колону за пречишћавање на собну температуру на 5 мин да бисте у потпуности уклонили преостали етанол.

    9. Комплет је погрешно коришћен.

    Предлог: За биљне узорке полифенолних полисахарида, коришћење уобичајених комплета као што је комплет за изолацију укупне РНК биљака можда неће моћи да добије идеалне узорке РНК.Препоручујемо вам да користите Плант Тотал РНА ИсолатионКит Плус, који је посебно дизајниран за узорке биљака полифенолних полисахарида.Комплет специјално развијен за екстракцију РНК из биљних узорака полифенола и полисахарида.

    Вредност ОД260/ОД280 је ниска

    РНК елуирање са ддХ2О и коришћено за очитавања спектрофотометра резултира ниским вредностима ОД260/ОД280.Препоручујемо коришћење 10 мМ Трис-ХЦл, пХ 7,5 (уместо ддХ2О без РНазе за елуирање РНК) да бисте добили релативно тачне вредности ОД260/ОД280, погледајте „Анали за концентрацију РНК и пречишћавање“ на страни 19.

    Пречишћена РНК се разграђује

    Квалитет пречишћене РНК је повезан са факторима као што су очување узорка, контаминација РНК-азом и манипулација.

    Анализа уобичајених узрока:

    1. Узорци ткива нису сачувани на време након сакупљања.

    Препорука: Ако се узорци ткива не користе на време након сакупљања, одмах их похраните у течном азоту на ниској температури или их пренесите на -80°Ц за дуготрајно складиштење након брзог замрзавања у течном азоту, или одмах потопите узорке у раствор РНА стабилизатора РНАлатер (животињски узорци).За екстракцију РНК покушајте да користите свеже сакупљене узорке ткива.

    2. Поновљено замрзавање и одмрзавање узорака ткива.

    Препорука: Приликом складиштења узорака ткива, најбоље је да их исечете на мале комаде ради очувања, а део извадите када их користите да бисте избегли деградацију РНК узроковану поновљеним замрзавањем и одмрзавање узорака.

    3.РНасе се уводи у операциону салу или се не носе рукавице за једнократну употребу, маске итд.

    Предлог: Експерименте екстракције РНК најбоље је изводити у одвојеним РНК операцијама, а пре експеримента треба очистити лабораторијски сто, а током експеримента треба носити рукавице и маске за једнократну употребу како би се у највећој мери избегла деградација РНК узрокована увођењем РНКазе.

    4. Реагенс је контаминиран РНазом током употребе.

    Предлог: Замените новом серијом комплета за екстракцију укупне РНК биљака за сродне експерименте.

    5. Центрифугалне епрувете и врхови пипете који се користе за манипулацију РНК су контаминирани РНазом.

    Предлог: Уверите се да епрувете за центрифугирање, врхови пипета, пипете итд. који се користе за екстракцију РНК не садрже РНКазу.

    Упутства за употребу:

    Комплет за изолацију укупне РНК биљака плус упутство за употребу

     

    Напишите своју поруку овде и пошаљите нам је