Директни РТ-кПЦР комплет
Опис комплета:
◮ Директни РТ-кПЦР комплет, који користи Фореаси реверзну транскриптазу и Фореаси ХС Так ДНК полимеразу коју развија Форегене, са јединственим реакционим пуфером, чини овај комплет са јаком отпорношћу и компатибилношћу, и може директно тестирати реакцију користећи Форегене Лисис систем као шаблон.Овај комплет се може применити за комплет за откривање нуклеинске киселине ЦОВИД-19 и развој комплета за откривање нуклеинских киселина других патогених бактерија.
Опис
Директни РТ-кПЦР комплет обезбеђује одвојено упаковани РТ-кПЦР пуфер и високо ефикасан ензиммешавина (Так、М-МЛВ、РИ), што га чини погодним за креирање бацк-енд комплета и системаподешавање, у оквиру једноставне провере.
Спецификације
500Т, 50,000Т
Компоненте комплета
| Садржај комплета (20 μЛ реакциони систем) | ИМ-05111-01 | ИМ-05112-01 |
| 500 Т | 50.000 Т | |
| Директна мешавина ензима | 500 μЛ×1 | 50 мЛ×1 |
| 2× Директни РТ-кПЦР пуфер | 1 мЛ×5 | 500 мЛ×1 |
| Упутство | 1 | 1 |
Оперативни кораци
Пре припреме реагенса, све реагенсе у комплету треба одмрзнути на собној температури и лагано измешати.
A: Припремити of шаблон и реагенс
1. Припремите припремљени РНК шаблон (препоручује се употреба комплета серије Форегене Тотал РНА Исолатион Кит за екстракцију и пречишћавање РНК шаблона) или производа за крекирање узорка (препоручује се употреба Форегене Лисис система), специфичне прајмере (10 μМ) и друге релевантне потрошне материјале, инструмент.
2. Ставите 2× Дирецт РТ-кПЦР пуфер, ддХ2О без РНасе и 20× РОКС референтну боју (ако је'потребно) у кутији са ледом, чинећи да се природно топе и лагано мешају.
B: Припремити of РТ-кПЦР система
Сто 1 : Припремити of РТ-кПЦР sсистем
| Саставни део | Волуме | Коначна концентрација |
| 2× Директни РТ-кПЦР пуфер | 10 μЛ | 1× |
| Директна мешавина ензима | 1μЛ | |
| Предњи прајмер (10 μМ) | 0,8 μЛ | 50-900нМ |
| Реверзни прајмер (10 μМ) | 0,8 μЛ | 50-900нМ |
| Сонда (4 μМ) | 1μЛ | 200нМ |
| Шаблон (РНА или лизат) | Кс μЛ | |
| 20×РОКС референтна боја | - | 1* |
| РНасе-ФрееддХ2О | (6,4-Кс) μЛ | |
| Укупан обим | 20μЛ |
C: Комплет тхе РТ-кПЦR реакција програм
Сто 2 : РТ-кПЦР реацтиon програм подешавање (за пример: два-Корак методом)
| Корак | Температура | време | Циклуси | Садржај | |
| 1 | 50℃ | 15 мин | 1* | 1 | Реверзна транскрипција |
| 2 | 95℃ | 1 минут | 1 | Пре-денатурација | |
| 3 | 95℃ | 10 сец | 40-45 | Денатурација | |
| 60℃ | 30 сек 2* | Аннеал/Ектенсион | |||
Складиштење и рок трајања
-Комплет треба чувати на -20± 5℃.Рок важења је 12 месеци.
-Избегавајте поновљене циклусе замрзавања-одмрзавања (<5 циклуса).
