ФореДирецт РТ-кПЦР комплет
Опис комплета:
◮За директно амплификацију РНК у реалном времену из збирки брисева без процеса пречишћавања РНК.Овај комплет завршава циклусе кРТ-ПЦР у року од једног сата.Мешавина ензима је оптимизована мешавина реверзне транскриптазе, Хот-Старт Так ДНК полимеразе, инхибитора РНазе.Реакциони пуфер садржи све потребне компоненте, укључујући оптимизоване компоненте пуфера, Мг2+, дУТП и дНТП.
Опис
ФореДирецт РТ-кПЦР комплет је дизајниран за директну амплификацију РНК у реалном времену из збирки брисева без процеса пречишћавања РНК.Овај комплет завршава циклусе кРТ-ПЦР у року од једног сата.Мешавина ензима је оптимизована мешавина реверзне транскриптазе, Хот-Старт Так ДНК полимеразе, инхибитора РНазе.Реакциони пуфер садржи све потребне компоненте, укључујући оптимизоване компоненте пуфера, Мг2+, дУТП и дНТП.
Спецификације
100Т
Компоненте комплета
| Средство за ослобађање нуклеинске киселине |
| РНК заштитник |
| 2× РТ-кПЦР пуфер |
| Мешавина ензима (Так&М-МЛВ) |
| Упутства |
ПЦР апликација
1. Када се ПЦР реакционе епрувете накратко центрифугирају, ставите их у резервоар за узорке инструмента за појачавање.
2. Термички протокол
| Корак | Температура | време | Циклуси | |
| 1 | Реверзна транскрипција | 50℃ | 15 мин | 1 |
| 2 | Пре-денатурација | 95℃ | 1 минут | 1 |
| 3 | Денатурација | 95℃ | 10 секунди | 42 |
| 4 | Аннеал/Ектенсион | 60℃ | 30 секунди | |
Белешка:Флуоресцентни сигнал је детектован одмах након корака продужетка сваког циклуса.
3. Након подешавања, сачувајте датотеку и покрените реакциони програм.
Оперативни кораци
Пре припреме реагенса, све реагенсе у комплету треба одмрзнути на собној температури и лагано измешати.
Припрема реагенса
1. Припремите смешу за ослобађање нуклеинске киселине
| Саставни део | Волумен по узорку или контроли |
| Средство за ослобађање нуклеинске киселине | 5μЛ |
| РНК заштитник | 0,5 μЛ |
2. Припремите реакциону мешавину
| Саставни део | Волумен по узорку или контроли |
| 2× РТ-кПЦР пуфер | 15 μЛ |
| Мешавина ензима (Так&М-МЛВ) | 1,5 μЛ |
| Прајмери и сонде | 1μЛ |
Складиштење и рок трајања
-Комплет треба чувати на -20± 5℃.Рок важења је 12 месеци.
-Избегавајте поновљене циклусе замрзавања-одмрзавања (<5 циклуса).
